1.在重蒸酚中為什么加入0.1%的8-羥基喹啉及少量巰基乙醇?
保存在冰箱中的酚，容易被空氣氧化而變成粉紅色，這樣的酚容易降解DNA，一般不可以使用。為了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羥基喹啉及少量巰基乙醇。8-羥基喹啉是帶有淡黃色的固體粉沫，不僅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。
2.如何將不同構(gòu)型的質(zhì)粒DNA區(qū)別開(kāi)?
由于不同構(gòu)型的DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移率不同，ccc DNA的泳動(dòng)速度最快，通過(guò)凝膠電泳方法可將不同構(gòu)型的DNA區(qū)別開(kāi)。
3.用酚-氯仿抽提細(xì)胞基因組DNA時(shí)，通常要在酚-氯仿中加少許異戊醇，為什么?
異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產(chǎn)生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定。
4.用乙醇沉淀DNA時(shí)，為什么加入單價(jià)的陽(yáng)離子?
用乙醇沉淀DNA時(shí)，通常要在溶液中加入單價(jià)的陽(yáng)離子，如NaCl 或 NaAc，Na+中和DNA分子上的負(fù)電荷，減少DNA分子之間的同性電荷相斥力，而易于聚集沉淀。
5.在提取RNA時(shí)經(jīng)常使用異硫氰酸胍，有什么作用?
RNA是一種極易降解的核酸分子。高濃度強(qiáng)變性劑異硫氰酸胍使細(xì)胞結(jié)構(gòu)迅速被破壞，使RNA從細(xì)胞中釋放出來(lái)。同時(shí)高濃度異硫氰酸胍還使細(xì)胞內(nèi)的RNA酶失活，使釋放出的RNA不被降解。
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